雖然我們對(duì)胎牛血清的功能清楚，但血清的成分非常復(fù)雜，時(shí)至今日對(duì)其準(zhǔn)確的成分、含量及其作用機(jī)制仍不清楚，尤其是對(duì)其中一些多肽類生長(zhǎng)因子、激素和脂類等尚未充分認(rèn)識(shí)。
其次血清都是批量生產(chǎn)，各批量之間差異很大，而且血清保存期至多一年，因此，要保證每批血清的相似性極為困難，在細(xì)胞培養(yǎng)中避免不了要做血清篩選，那如何篩選血清呢？
血清的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：
1、內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)為不高于5EU/ml。
2、總蛋白含量胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml，數(shù)值偏高偏低都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的正常進(jìn)行。
3、血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)為不高于20mg/dl。
4、pH。國(guó)產(chǎn)血清、大多高于7.5，進(jìn)口胎牛血清，大多低于7.5，根據(jù)PH的高低可用來(lái)初步鑒別血清的來(lái)源。
5、微生物。包括細(xì)菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原性病毒等，大多都能清除。大腸桿菌噬菌體無(wú)法過(guò)濾，很難徹底清除，但對(duì)血清質(zhì)量影響不大。病原性病毒，在國(guó)產(chǎn)血清中幾乎90%以上都存在，是影響國(guó)產(chǎn)血清質(zhì)量的重要原因之一。
在實(shí)際篩選時(shí)，主要從血清外觀和實(shí)驗(yàn)操作時(shí)細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)進(jìn)行。
從外觀上：
1、顏色：根據(jù)血紅蛋白含量的不同，胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色，這個(gè)指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采血過(guò)程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度。胎牛血清或多或少總有點(diǎn)溶血，因?yàn)樘ヅＱ迥δ懿睿t細(xì)胞容易破裂；
2、澄清度：高質(zhì)量的胎牛血清由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低，表現(xiàn)為稀薄、清淡；
3、血清沉淀：血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生，對(duì)血清質(zhì)量沒(méi)有影響，沉淀的產(chǎn)生原因跟加工生產(chǎn)方式、是否反復(fù)凍融密切相關(guān)，在實(shí)驗(yàn)操作中可能會(huì)對(duì)細(xì)胞觀察產(chǎn)生影響。
從性能上：
1、細(xì)胞形態(tài)，在進(jìn)行血清篩選時(shí)首先觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)形態(tài)是否產(chǎn)生明顯變化，以及觀察貼壁細(xì)胞的貼壁情況，細(xì)胞在不同血清培養(yǎng)中可能會(huì)出現(xiàn)形態(tài)上的差異；
2、倍增時(shí)間，一般情況下會(huì)選擇倍增時(shí)間短的血清，值得注意的是血清的影響會(huì)傳至5代，在進(jìn)行測(cè)試時(shí)，先培養(yǎng)五代后進(jìn)行計(jì)倍增時(shí)間的計(jì)算；
3、克隆形成率，測(cè)試時(shí)一般選50、100、200個(gè)細(xì)胞進(jìn)行平板克隆測(cè)試，平均5d左右換一次液，兩周后染色計(jì)數(shù)，對(duì)比克隆形成情況。
服務(wù)熱線：0592-5771844
更新時(shí)間：2023-03-13
點(diǎn)擊次數(shù)：1045
當(dāng)前位置：
